陈皮挥发油与橙皮苷提取工艺的实验研究

陈皮为芸香科植物橘Citrus reticulata Blaneo及其栽培变种的干燥成熟果实。药材分为“陈皮”和“广陈皮”。味苦、辛，性温，归肺、脾经。具有理气健脾、燥湿化痰之功效，常用于胸脘胀满、食少吐泻、咳嗽多痰。陈皮含挥发油及橙皮苷等有效万分。其中挥发油可采用水蒸气蒸馏法提取；而橙皮苷在碱水中的溶解度比较在，可采用碱水提取的方法。根据组方药材的特点，我们在中药三类新药“儿宝”的工艺设计中，单独对陈皮采取先提取挥发油，再从其药渣中提取橙皮苷的处理方法。本文报道陈皮挥发油及橙皮苷提取工艺的优选实验结果。

1  实验仪器与材料

1.1  仪器

高效液相色谱仪（Waters 515pump,Waters 2487紫外检测器，Waters U6K进样器，WDL-95色谱工作站）：16C-型高速离心机；SB5200-型超声清洗机（上海Branson公司）；Shimazhu Libror AEL-40SM+万分之一电子天平（日本岛津）；挥发油提取器（自制）等。

1.2  试剂及药品

   氢氧化钙（AR）；三氟乙酸（AR）；甲醇（AR）；陈皮（购于南京市药材公司）经本校中药鉴定教研室吴启南副教授鉴定，符合《中国药典》标准。

2  实验方法与结果

2.1  挥发油提取工艺的优选

取陈皮200g，加14倍量水，进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液，并观察挥发油量的变化情况。现以挥发油增量为指标，来考察蒸馏液体积与挥发油增量之间的关系。我们发现蒸馏液体积达到6倍以后，挥发油的增量明显减少。故在生产中，收集6倍量的蒸馏液即可。此外，加14倍量水，收集7.5倍蒸馏液后，尚可倒出0.5倍拒绝液。由此可知，陈皮的吸水量为6倍。所以，陈皮挥发油的提取工艺条件为：加12倍量水，收集6倍量的蒸馏液。

2.2  橙皮苷碱提取工艺的正交试验

2.2.1  正交设计 根据浸提理论及预试验结果，陈皮的碱水煎煮工艺与加水量、煎煮时间及Ca(OH)₂用量等因素有密切关系。为了选择最佳的碱提取工艺条件我们选用了L₉（3⁴）正交表，以橙皮苷转移率与浸膏得率为考核指标，进行了9次试验，其因素水平表见表1。

2.2.2  橙皮苷的含量测定方法  本试验采用HPLC法测定样品中橙皮苷的含量，色谱条件为：Kromasil C₁₈柱（4.6mm×250mm，5μm）；2487检测器；流动相MeOH：0.1%TFA－II (42:58)；流速1.0ml/min;λ_s==283nm；AUFS=1.0；进样量5μg，柱温T=30C。橙皮苷的标准曲线为：Y=9.920×10³X+8475.5,R=0.9999。并且橙皮苷在0.013  25～0.424mg/ml之间呈良好的线性关系。

2,23  数据处理与分析  根据L₉（3⁴）正交表，9次试验的有关数据及其计算分析，结果见表2和表3。

表2  橙皮苷碱水提取工艺正交试验的L₉（3⁴）表

注：*Z=0.8X+0.2y-47

表3  橙皮苷碱水提取工艺正交试验的方差分析

注：*提取率以药材对照，F_（2,2）0.05=19.0

由表3可知，A、B、C三因素对结果无明显影响。从陈皮中提取橙皮苷的最佳工艺条件为A₃、B₂、C₁，即（在药材加12倍水进行水蒸汽蒸馏并收集6倍蒸馏液后）加（9+7）倍水和投料量12%的Ca(OH)₂、回流（0.5+0.5）h。

2.2.4  最佳工艺的验证  取陈皮3份，每份500g，各按照上述最佳工艺条件进行挥发油和橙皮苷的提取，并测定提取液中橙皮苷的含量，结果见表4。

表4  橙皮苷最佳提取工艺条件的验证结果

由上表可知，按正交试验优选而得的最佳工艺进行提取试验，三次结果的综合评分均处于最高水平，这说明该工艺是稳定可行的，适合于工业一产。

3  讨论

3.1  生产上通常是通过考察挥发油增量与蒸馏时间之间的关系来确定陈皮挥发油提取程度的。而本实验通过考察挥发油增量与蒸馏液体积之间的关系来确定陈皮挥发油的提取程度，这是为了确定药渣中残留的含水量，以便控制正交试验时的加水量。

3.2  用NaOH调节PH值时，由于果胶溶出过多，不仅过滤困难而且药液损失过大。而用Ca(OH)₂调节pH值时，它不仅可以沉淀部分果胶，对过滤很有利，而且药液损失很少。此外，Ca(OH)₂一次加入（即在挥发油提取结束后，第一次回流之前加入），在后来的实验中，我们测得两次药液的pH值均在8～9.5之间，已经达到了碱性条件，这说明Ca(OH)₂一次加入是切实可行的。

摘自《国内植物提取物最新提取工艺汇编》