吸附百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂制造及检定规程

本品系由百日咳菌苗原液、精制白喉类毒素及精制破伤风类毒素用氢氧化铝吸附制成。供儿童预防百日咳、白喉及破伤风之用。

1　抗原要求

1.1　百日咳菌苗原液应符合附录1《百日咳菌苗原液制造及检定要求》中2.4项的规定。

1.2　精制白喉类毒素应符合《吸附精制白喉类毒素制造及检定规程》中4项的要求。

1.3　精制破伤风类毒素应符合《吸附精制破伤风类毒素制造及检定规程》中4项的要求。

2　制造

2.1　配方

每ml制剂中各种抗原成份含量如下：

百日咳菌45亿～90亿

精制白喉类毒素20Lf

精制破伤风类毒素5Lf

2.2　吸附剂配制，见《吸附精制破伤风类毒素制造及检定规程》5项。

2.3　氢氧化铝稀释

以蒸馏水按吸附后之总量将氢氧化铝原液稀释成1.0～1.5mg　/ml。硫柳汞含量不超过0.01%（g　/ml），氯化钠含量补足至0.85%（g　/ml），高压蒸汽灭菌。

2.4　吸附

按计算量将精制白喉类毒素、精制破伤风类素及百日咳菌苗原液加入稀释好的吸附剂内。调节pH至5.8～7.2。

2.5　分批

同批吸附剂同批配合的原液同次吸附的制品为1批。如用大罐吸附时，所用抗原和吸附剂可以多批混合（精制类毒素不超过3批），每罐为1批。

3　成品检定

3.1　物理化学检查

3.1.1　振摇后应呈均匀乳白色混悬液。不应有摇不散的凝块或异物。

3.1.2pH值应为5.8～7.2。

3.1.3　氯化钠含量为0.75%～0.9%(g　/ml)。

3.1.4　硫柳汞含量为1.0%～0.5%(mg　/ml)。

3.1.5　硫柳汞含量不超过0.01%(g　/ml)。

3.2　鉴别试验

抽取样品，另枸橼酸钠或用其他适宜方法将吸附剂溶解后，离心沉淀百日咳菌体和残留的吸附剂，按《吸附精制白喉类毒素制造及检定规程》中7.6项、《吸附精制破伤风类毒素制造及检定规程》中7.6项和附录1《百日咳菌苗原液制造及检定要求》中2.4.3项进行鉴别试验。

3.3　无菌试验

按《生物制品无菌试验规程》进行。

3.4　毒性试验

应符合附录1《百日咳菌苗原液制造及检定要求》中2.4.5项的规定。

3.5　安全试验

3.5.1　小白鼠法

用体重18～20g之健康小白鼠5只，每只皮下注射检品0.5ml观察7日，不得有局部脓肿或死亡。

3.5.2　豚鼠法

用体得300～400g豚鼠，每批制品不少于4只，每只皮下注射2.5ml，分两侧，每侧1.25ml，应符合《吸附精制白喉类毒素制造及检定规程》中4.4项及《吸附精制破伤风类毒素制造及检定规程》中4.5项要求。

3.6　效力试验

3.6.1　百日咳菌苗免疫力试验

每3批抽1批进行，应符合附录1《百日咳菌苗原液制造及检定要求》中1.2.5项的规定。

3.6.2　白喉及破伤风类毒素的效力试验

每更换1批类毒素时进行。取体重300～400g豚鼠4只，每只皮下注射0.5ml，第30天采血，将分离的血清等量混合，进行白喉及破伤风抗毒素单位测定。

3.6.2.1　白喉抗毒素单位测定

用Lr　/300家兔皮内法，要求每ml血清达到0.25IU。

3.6.2.2　破伤风抗毒素单位测定

用L+/100小白鼠皮下法，要求每ml血清达到0.5IU。

3.6.2.3　白喉类毒素的效力试验亦可采用攻毒法。取体重300～350g豚鼠5只以上，每只皮下注射0.5ml。第30天各皮下攻击白喉毒素200个MLD，观察7天，豚鼠死亡不得超过20%；同时另取体重240～270g豚鼠3只，各皮下注射1个MLD毒素作为对照，2只对照豚鼠应发病并于96小时内死亡，允许另1只较晚死亡或发病。

3.6.2.4　亦可按WHO推荐的效力检定方法（见《吸附精制白喉类毒素制造及检定规程》附录和《吸附精制破伤风类毒素制造及检定规程》附录）。

4　保存与效期

应保存于2～8℃。自吸附之日起效期为1年半。