二、胶体金pH值的调整
胶体金与蛋白质的结合成功与否，取决于pH值，一般只有在蛋白质等电点（PI）略偏碱的条件下二者才能牢固地结合，因此，标记之前须将胶体金溶液的pH值调至待标记蛋白质的等电点略偏碱。需要提高胶体金的pH值时可用0.1molK2CO3，需要降低胶体金的pH值时可用0.1n HCl。测定金溶液的pH可能损害pH测定计的探头，因此，一般用精密的pH试纸测定其pH即可。 几种常用的蛋白质标记时胶体金所用的pH值见表5-4。 表5-4 常用几种蛋白质标记时胶体金所用的pH值如下 | 蛋白质 | pH | | 抗体（γ球蛋白） | 9.0 | | 亲合层析的IgG | 7.6 | | 单克隆抗体 | 8.2 | | F（ab＇）2 | 7.2 | | SPA(葡萄球菌蛋白) | 6.0 | | 蓖麻子植物凝血素Ⅰ | 8.0 | | 蓖麻子植物凝血素Ⅱ | 8.0 | | 花生凝集素 | 6.3 | | Helix pomatia lectin | 7.4 | | 大豆凝集素 | 6.1 | | Lens Culinaris lectin | 6.9 | | Lotus Tetragonolobus lectin | 6.3 | | 荆豆凝集素 | 6.3 | | Bandeirae simplicifolia lectin | 6.2 | | 过氧化物酶 | 8.0 | | 类卵粘蛋白 | 4.8 | | 血浆铜兰蛋白 | 7.0 | | α-胎球蛋白 | 6.5 | | 小牛血清白蛋白 | 6.5 | | 牛血清白蛋白 | 5.5 | | 牛血球白蛋白结合肽 | 4.5 | | 牛血清白蛋白结合胰岛素 | 5.3 | | 霍乱毒素 | 6.9 | | 破伤风毒素 | 6.9 | | DNAase | 6.0 | | RNAase | 9.0 | | 低密度脂蛋白 | 5.5 | | α2-巨球蛋白 | 6.0 | | 抗生物素蛋白（亲合素） | 10.0 | | 链霉抗生物素蛋白 | 6.6 | | 麦胚凝集素 | 9.9 |
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