二、酶法（GK-GPO-POD比色法）

血清中甘油三酯经脂肪酶水解为甘油和脂肪酸，甘油在甘油激酶（GK）及ATP存在下，生成3-磷酸甘油，尔后，在磷酸甘油氧化酶（GPO）作用氧化成磷酸二羟丙酮并生成H₂O₂，H₂O₂与底物4-氨基安替比林和ESPAS在过氧化物酶（POD）作用下，生成红色亚醌化合物（quinoneimine），比色（500nm），其颜色深浅与甘油三酯含量成正比。

（一）手工测定法

1．试剂组成

代号	种类	浓度	贮存2～8℃
R1	磷酸甘油氧化酶	≥3.0KU/L	冷藏
（A液）	抗坏血酸氧化酶	≥1.0KU/L
	甘油激酶	≥0.7KU/L
	4-氨基安替比林	80mg/L
R2	脂蛋白脂酶	≥2.0KU/L	冷藏
	过氧化物酶	≥10KU/L
	ESPAS	300mg/L
R3（参考液）	甘油酸三脂	200mg/dl（2.26mmol/L）	冷藏

*：一般采用商品试剂盒

图15-4 血清甘油三酯测定法（酶法）操作图

2．操作

按图15-4操作。

3．计算

血清TG浓度=E_SA/E_ST×2.26(mmol/L)

（二）生化分析仪检测

全自动生化分析仪测定操作（以CL-7200型为例）。

1．试剂

A液：GK，GPO，4-AA-P、抗坏血酸氧化酶等。

B液：POD，Lipase,ESPAS等。

标准液：甘油三油酸酯 200mg/dl(2.26mmol/L)。

2．上机参数

名称	参数
方法	终点法
波长	双波长（540nm 700nm）
试剂A反应时间	2～3min
试剂B反应时间	5～6min
反应温度	37℃
样本用量	4μl
试剂A用量	200μl
试剂B用量	100μl
单位	mmol/L

3．操作过程

4．计算

以△A=A2-A1并根据同样之标准或质控物计算，自动打印结果。

5．注意事项

①试剂与样本量可根据分析仪要求按比例改变。

②试剂在有效期内2～8℃避光保存。

③样本中甘油三酯含量超过11mmol/L需用生理盐水稀释后再测。