二、酶法《动脉粥样硬化》

二、酶法

1.原理

血清中游离脂肪酸或非酯化脂肪酸(NEFA),经酶试剂作用生成紫色化合物,其颜色深浅与NEFA含量成正比。

2.试剂组成

代号种类组成浓度贮存贮存
R1缓冲液磷酸缓冲液
MgCl2
去垢剂
0.04mmol/LpH6.9
3mol/L
 
R2酶/辅酶乙酰CoA合成酶
抗坏血酸氧化酶
CoA
ATP
4-AAP
溶于10ml R1液中
≥0.3U/ml
≥1.5U/ml
0.9mmol/L
5.0mmol/L
1.5mmol/L
冷藏5日
R3酶稀释液苯氧乙醇
去垢剂
0.3%(V/V) 
R4 马来酰亚胺
该试剂与R3等体积混合
10.6mmol/L 
R5酶试剂乙酰CoA氧化酶
过氧化物酶
TOOS
混合上述试剂,再等体积R4试剂混合
≥10U/ml
7.5U/ml
0.2mmol/L
冷藏5日
R6标准液 1mmol/L冷藏

*应用带玻塞离心管

3.操作

按图15-8操作。

4.计算

血清非酯化脂肪酸测定(光度法)操作图

血清非酯化脂肪酸测定(光度法)操作图

图15-7 血清非酯化脂肪酸测定(光度法)操作图

血清非脂化脂肪酸测定(酶法)操作图

图15-8 血清非脂化脂肪酸测定(酶法)操作图

(胡汉宁 储建中)

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